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专利号: 2022108483885
申请人: 江西农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,包括:野外观测获取蝴蝶幼虫后进行当地饲养,待幼虫蜕皮完成后获取蜕皮,从所述蜕皮中提取获得gDNA的步骤;所述蜕皮不包括头壳;

从所述蜕皮中提取获得gDNA的具体方法包括:所述蜕皮研磨后,加入裂解缓冲液和蛋白酶,混匀后进行孵育,之后再加入含有盐酸胍的裂解液进行核酸纯化,加入无水乙醇后,利用滤柱过滤收集得到所述gDNA;

所述孵育的具体操作包括:先55℃孵育4h,孵育结束后,‑20℃保存不低于3h,再将样品

55℃二次孵育2h。

2.根据权利要求1所述的野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,所述当地饲养的具体操作包括:将所述蝴蝶幼虫置于当地室温,每日观察取食活动状态,清理粪便,更换采自当地的寄主植物叶片,进行当地饲养。

3.根据权利要求1所述的野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,在提取gDNA前,将获取的蜕皮浸没入无水乙醇中进行保存。

4.根据权利要求1所述的野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,所述裂解缓冲液为BufferATL。

5.根据权利要求1所述的野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,所述蛋白酶为蛋白酶K。

6.根据权利要求1所述的野外蝴蝶监测无损伤取样方法,其特征在于,所述含有盐酸胍的裂解液为BufferAL。