1.一种白藜芦醇的生物萃取方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)先以新鲜虎杖根为原料,洗净、粉碎后调节水分重量含量为50~60%,进行蒸汽爆破处理,得到虎杖浆料;
(2)再以纤维素酶、壳聚糖、赖氨酸、戊二醛溶液、氮化硼纳米片、六水合硝酸钴为原料,制成固定化纤维素酶,接着将虎杖浆料泵入装有固定化纤维素酶的柱式反应器中进行反应,收集流出浆料,并对柱式反应器进行水洗,收集水洗浆料,合并流出浆料和水洗液,得到提取浆料;
(3)然后以纳米四氧化三铁为核,单宁酸为中间吸附层,聚(N‑异丙基丙烯酰胺)为外壳,得到磁性吸附剂;接着利用该磁性吸附剂对提取浆料进行吸附处理,磁铁收集吸附后的吸附剂,最后将吸附后的吸附剂完全浸没于无水乙醇中,在无水乙醇循环流动和超声波振荡条件下进行解吸附,磁铁分离除去解吸附后的吸附剂,浓缩,干燥,即得白藜芦醇;
步骤(2)中,以重量份计,固定化纤维素酶的制备方法如下:
(A)先将1~2份壳聚糖均匀分散于100份质量浓度0.1~0.2%盐酸溶液中,得到壳聚糖分散液,接着边搅拌边将壳聚糖分散液缓慢加入100份液体石蜡中,搅拌混匀,得到壳聚糖微球分散液;将1~2份氮化硼纳米片超声分散于8~10份蒸馏水中,400~500W超声振荡30~40分钟,接着加入8~10份六水合硝酸钴、8~9份六亚甲基四胺、70~80份无水乙醇,加热至回流,保温搅拌反应7~9小时,离心取沉淀,得到复合纳米材料;
(B)将壳聚糖微球分散液加热至40~50℃,逐滴滴入0.2~0.3份吐温‑80,搅拌混匀,加入130~150份质量浓度0.7~0.9%戊二醛溶液和0.3~0.5份碳酸钙,保温搅拌60~70分钟,调节pH=9~10,加热至60~70℃,保温搅拌2~3小时,加入步骤(A)所得复合纳米材料,保温搅拌20~30分钟,过滤取固体,石油醚、无水乙醇交替洗涤2~3次,利用2~3份质量浓度2~3%盐酸溶液溶解碳酸钙,水洗至中性,得到交联壳聚糖树脂;
(C)然后将交联壳聚糖树脂、0.1份纤维素酶加入40~50份蒸馏水中,300~500r/min室温搅拌60~70分钟,接着边搅拌边加入1~1.5份赖氨酸和质量浓度20~30%二环己基碳二亚胺乙醇溶液,使得二环己基碳二亚胺乙醇溶液所含二环己基碳二亚胺的摩尔数与赖氨酸的摩尔数相等,室温搅拌反应20~30分钟,过滤取固体,无水乙醇洗涤2~3次,水透析10~
12小时,再次过滤取固体,干燥,即得固定化纤维素酶;
步骤(3)中,以重量份计,所述磁性吸附剂的制备方法如下:先将0.3~0.4份单宁酸溶于水中配制成0.8~1mol/L单宁酸溶液,接着将1份纳米四氧化三铁加入单宁酸溶液中,300~500r/min搅拌10~15分钟,使得单宁酸包覆于纳米四氧化三铁表面;然后加入20~22份水、1~1.2份N‑异丙基丙烯酰胺、0.3~0.4份乙二醇二甲基丙烯酸酯、0.08~0.1份偶氮二异丁腈、0.01~0.02份十二烷基苯磺酸钠,在氮气保护条件下,60~70℃搅拌聚合反应80~
100分钟,过滤取固体,无水乙醇、水交替洗涤3~5次,即得所述的磁性吸附剂。
2.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(1)中,新鲜虎杖根洗净后粉碎至60~80目。
3.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(1)中,蒸汽爆破处理的工艺条件为:在1~2MPa压力条件下维持5~6分钟进行蒸汽爆破处理。
4.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(2)中,虎杖浆料的每小时泵入量为柱式反应器体积的3~4倍,在柱式反应器中的反应条件为:45~55℃反应28~30小时。
5.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(2)中,水洗次数为2~3次,每次水洗所用的水量与柱式反应器等体积。
6.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(3)中,吸附处理的具体方法为:将磁性吸附剂加入提取浆料中,300~500r/min搅拌20~30分钟即可;其中,磁性吸附剂与提取浆料的质量比为2~3:100。
7.根据权利要求1所述的一种白藜芦醇的萃取方法,其特征在于,步骤(3)中,解吸附的工艺条件为:无水乙醇循环流动速度为55~65mL/min,超声波频率为18~20kHz,超声波功率为200~220W,解吸附时间为25~35分钟。