1.一种用于模拟HBV暴露和乙肝疫苗免疫反应的婴儿未成熟树突状细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)培养1岁婴儿来源的单核细胞系THP‑1:以完全培养基采取半换液的方式进行培养;
2)完全培养基的制备:完全培养基的各组分的质量百分比为:含89%的1640培养基,1%的青霉素‑链霉素溶液和10%的胎牛血清;
3)第一混合液的制备:培养第一天,取1瓶THP‑1细胞混匀,吸取1ml放置到六孔板的第一孔中,再向第一孔中加入1ml含rhGM‑CSF和rhIL‑4的完全培养基形成第一混合液;
4)第二混合液的制备:培养第三天,用移液枪充分吹打第一孔底壁,吸取1ml第一孔内的第一混合液放置到六孔板的第二孔中,再向第一孔和第二孔中均加入1ml含rhGM‑CSF和rhIL‑4的完全培养基形成第二混合液;
5)第三混合液的制备:培养第五天,用移液枪分别充分吹打第一孔和第二孔底壁,再从第一孔和第二孔各吸取1ml第二混合液分别放置到六孔板的第三孔和第四孔中,再向第一孔、第二孔、第三孔和第四孔中分别加入1ml含rhGM‑CSF和rhIL‑4的完全培养基形成第三混合液;
6)培养第七天,从第三混合液中得到婴儿未成熟树突状细胞;其中所述步骤3)中取用6
的THP‑1细胞的浓度为1.0×10个/ml,加入的rhGM‑CSF浓度为14ng/ml,加入的rhIL‑4浓度为3ng/ml;其中所述步骤4)和步骤5)中的加入的rhGM‑CSF浓度为7ng/ml,加入的rhIL‑4浓度为1.5ng/ml。
2.如权利要求1所述的婴儿未成熟树突状细胞的制备方法在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫反应的体外模拟研究中的应用。