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专利号: 202310652464X
申请人: 鲁东大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种与小麦旗叶长和穗长相关的分子标记,其特征在于,所述分子标记为FLL‑5A‑ID1和FLL‑5A‑ID2,二者位于小麦的5A染色体上,是InDel标记,均包含Hapl a和Hapl b  2种单倍型,其中:FLL‑5A‑ID1可由SEQ ID NO:5所示的上游引物和SEQ ID NO:6所示的下游引物扩增得到,FLL‑5A‑ID1的Hapl a类型的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,序列长度114bp,FLL‑5A‑ID1的Hapl b类型的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,序列长度72bp;

FLL‑5A‑ID2可由SEQ ID NO:7所示的上游引物和SEQ ID NO:8所示的下游引物扩增得到,FLL‑5A‑ID2的Hapl a类型的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示,序列长度236bp,FLL‑5A‑ID2的Hapl b类型的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示,序列长度227bp。

2.权利要求1所述的与小麦旗叶长和穗长相关的分子标记FLL‑5A‑ID1和FLL‑5A‑ID2在选育小麦优异产量性状中的应用。

3.利用权利要求1所述的与小麦旗叶长和穗长相关的分子标记FLL‑5A‑ID1和FLL‑5A‑ID2选育小麦优异产量性状的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:提取待测小麦品种或品系的基因组DNA;

步骤2:以待测小麦品种或品系的基因组DNA为模板,用SEQ ID NO:5所示的上游引物和SEQ ID NO:6所示的下游引物以及SEQ ID NO:7所示的上游引物和SEQ ID NO:8所示的下游引物单独进行PCR扩增或一起进行PCR扩增,得到PCR产物;

步骤3:将得到的PCR产物在6.0%的非变性聚丙烯酰胺凝胶上稳压电泳分离,如果PCR产物出现了分子量大小为114bp的扩增片段或者分子量大小为236bp的扩增片段,则该小麦品种或品系为Hapl a类型,其含有增加小麦旗叶长和穗长的等位基因,如果PCR产物出现了分子量大小为72bp的扩增片段或者分子量大小为227bp的扩增片段,则该小麦品种或品系为Hapl b类型,其不含有增加小麦旗叶长和穗长的等位基因。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在步骤2中,单独进行PCR扩增时,PCR扩增反应体系为10μl,具体包括:

1μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID1‑F或FLL‑5A‑ID2‑F;

1μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID1‑R或FLL‑5A‑ID2‑R;

1μl浓度为20ng/μL以上的DNA模板;

5μl 2×Taq PCR预混试剂;

2μl ddH2O。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在步骤2中,一起进行PCR扩增时,PCR扩增反应体系为10μl,具体包括:

0.5μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID1‑F;

0.5μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID1‑R;

0.5μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID2‑F;

0.5μl浓度为2μmol/L的FLL‑5A‑ID2‑R;

1μl浓度为20ng/μL以上的DNA模板;

5μl 2×Taq PCR预混试剂;

2μl ddH2O。